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植物赤霉素含量檢測(cè)試劑盒-elisa方法

更新時(shí)間:2019-01-17      瀏覽次數(shù):2104

植物赤霉素含量檢測(cè)試劑盒-elisa方法

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應(yīng)分別小于10%和15% 。

 

檢測(cè)范圍:                                              

3.75 pmol/L - 120 pmol/L

 

靈敏度:                                              

低檢測(cè)濃度小于0.1 pmol/L

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本植物赤霉素(GA)水平。用純化的植物赤霉素(GA)捕獲抗體包被微孔板,制成固相體,往包被的微孔中依次加入植物赤霉素(GA),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物赤霉素(GA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品植物赤霉素(GA)含量。

植物標(biāo)本中相關(guān)酶或蛋白的測(cè)定:
1、 稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;;
2、 加入樣品體積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩沖液),
3、 請(qǐng)于4度,8000rpm,離心30分鐘,取上清并暫時(shí)保存于4度待用。 

 

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